JudulKarakterisasi Dan Optimasi Produksi Enzim Protease Dari Bakteri Isolat Asal Tanah Tempat Pembuangan Akhir |
Nama: TITIK NUR VITASARI |
Tahun: 2023 |
Abstrak ABSTRAK Protease merupakan enzim utama golongan hidrolase yang berperan penting dari segi fisiologi pada organisme dan sangat bermanfaat dalam perindustrian dengan harga yang sangat tinggi. Mikroorganisme merupakan penghasil enzim protease yang paling umum digunakan, yakni bakteri proteolitik. Tanah asal Tempat Pembuangan Akhir memiliki kondisi tanah serta keragaman hayati yang tinggi karena adanya sampah organik dan sampah anorganik dapat berpotensi sebagai pendukung pertumbuhan mikroba pendegradasi protein. Tujuan dilakukannya penelitian ini untuk mengetahui karakteristik aktivitas protease dari bakteri isolat asal tanah TPA dan mengetahui sumber nitrogen terbaik yang mendukung produksi enzim protease ekstraseluler dari bakteri isolat asal tanah TPA menggunakan tiga media dengan sumber nitrogen berbeda, yaitu Yeast Extract, Beef Extract dan Peptone. Metode yang digunakan adalah melakukan karakterisasi enzim dan optimasi. Terdapat 4 bakteri isolat terpilih (dari 5 isolat) yang didasarkan pada nilai indeks proteolitik tertinggi pada media Skim Milk Agar, yakni isolat IT1, IT2, IT3 dan ITT2. Keempat isolat tersebut memiliki karakter : nilai indeks proteolitik berkisar 0,25 – 2,17 mm; aktivitas enzim protease berkisar 0,015 – 0,114 U/ml; konsentrasi protein kasar yang dihasilkan berkisar 0,036 -0.055 mg/ml; Aktivitas spesifik ekstrak kasar enzim berkisar 0,34 – 2,58 U/mg; aktivitas optimum enzim protease aktif pada suhu 39,5oC dan pH optimum pada 6,8. Pepton pada medium adalah sumber nitrogen terbaik untuk mendukung produksi protease. Pada medium pepton, bakteri mampu tumbuh hingga log sel bakteri tertinggi 7,222 sel/ml; Bakteri mampu menghasilkan protein ektraseluler hingga konsentrasi protein tertinggi 0,062 mg/ml; dengan aktivitas enzim protease tertinggi 0,225 U/ml; yang diproduksi pada hari ke 2-3 setelah kultur. Kata kunci : Tempat Pembuangan Akhir, Protease, Aktivitas enzim, Bakteri Proteolitik, Optimasi ? ABSTRACT Proteases are the main enzymes of hydrolase that play an important role in terms of physiology in organisms, useful and valuable material in industrial sector. Microorganisms are the most commonly used as source of protease enzymes, namely proteolytic bacteria. The landfill originates has soil conditions and high biodiversity due to the presence of organic waste and inorganic waste that potentially as habitat of protein-degrading microbes. The purpose of this study were to determine the characteristics of the protease activity of bacteria which isolated from the landfill soil and selecting suitable media by nitrogen source that support the best production of extracellular protease enzymes from bacteria isolates, using three different nitrogen sources in media, namely Yeast Extract, Beef Extract and Peptone. The method used is characterization of enzymes and optimization. There were 4 selected bacterial isolates (out of 5 isolates) based on the highest proteolytic index on Skim Milk Agar media, namely IT1, IT2, IT3 and ITT2. The four isolates had the following characters: proteolytic index ranging from 0.25 to 2.17 mm; protease enzyme activity ranged from 0.015 – 0.114 U/ml; produced protein in concentration of 0.036 -0.055 mg/ml; The specific activity of the crude enzyme were ranged of 0.34 – 2.58 U/mg; optimum temperature protease enzyme is around 39,5oC and optimum pH was about 6.8. Optimizing step, Peptone was the best nitrogen source protease which has the following characters: the highest bacterial cell log of 7.222 cells/ml; the highest protein concentration was 0.062 mg/ml; highest enzyme activity was 0.225 U/ml; Which produced in the range of 2 - 3 days after incubation. Keywords : Landfill, Protease, Enzyme activity, Proteolytic Bacteria, Optimization |